Todos los rodenticidas anticoagulantes actúan de la misma manera, es decir, provocan la interferencia con la síntesis de los factores de coagulación, lo que se traduce en la aparición de hemorragias y la consiguiente muerte. En las células del hígado, la vitamina K1- 2,3 epóxido, biológicamente inactiva, es reducida por la acción de una enzima microsómica a vitamina K biológicamente activa, que es esencial para la síntesis de la protrombina y otros factores de la coagulación. Los raticidas anticoagulantes antagonizan con la enzima de la vitamina K1 epóxido reductasa en el hígado, causando una disminución gradual de la vitamina y, por consiguiente, de los factores de coagulación dependientes de la vitamina K. Esto se traduce en un aumento en el tiempo de coagulación de la sangre hasta el punto en el que se produce el fallo de dicho mecanismo de coagulación. El uso principal de los anticoagulantes en todo el mundo ha sido para el control de roedores comensales, principalmente la rata noruega o rata de las alcantarillas, las ratas de los tejados y los ratones comunes. Se han comercializado rodenticidas anticoagulantes con unas diez sustancias activas diferentes. Algunas se examinan a continuación para ilustrar sus propiedades. Algunas de ellas han sido registrados para el control de roedores comensales.
Los anticoagulantes de segunda generación son más agudamente tóxicos que los rodenticidas anticoagulantes de primera generación. Su superior potencia está relacionada con su mayor afinidad con la vitamina K epóxido reductasa. La bromadiolona y el difenacum fueron los primeros compuestos de la segunda generación introducidos en el mercado. Los tres anticoagulantes más potentes son brodifacum, flocumafen y difetialona.
No hay constancia de resistencia práctica en ratas de las alcantarillas ni ratones caseros a estos tres últimos anticoagulantes de segunda generación más potentes.