Tutti i rodenticidi anticoagulanti hanno la stessa modalità di azione, ovvero interferiscono con la sintesi dei fattori della coagulazione, provocando emorragia e morte. Nelle cellule del fegato, l'epossido della vitamina K1-2,3 biologicamente inattivo è ridotto a vitamina K biologicamente attiva da un enzima microsomiale, che è essenziale per la sintesi della protrombina e di altri fattori della coagulazione. I rodenticidi anticoagulanti antagonizzano l'enzima vitamina K1-epossido reduttasi nel fegato causando un progressivo esaurimento della vitamina e, di conseguenza, dei fattori della coagulazione che dipendono dalla vitamina K. Questo provoca un aumento del tempo di coagulazione del sangue fino al punto in cui il meccanismo di coagulazione ha esito negativo. L'uso principale di anticoagulanti in tutto il mondo è stato per il controllo dei roditori commensali, principalmente ratti norvegesi, ratti neri e topi domestici. Nel mercato sono stati introdotti circa dieci rodenticidi anticoagulanti. Alcuni verrano esaminati qui di seguito per illustrarne leproprietà. Un certo numero di questi è stato registrato per il controllo dei roditori commensali.
Gli anticoagulanti di seconda generazione hanno una tossicità maggiore dei rodenticidi anticoagulanti di prima generazione. La loro maggior potenza è legata alla maggiore affinità che presentano per la vitamina K-epossido reduttasi. Il bromadiolone e il difenacoum sono stati i primi composti di seconda generazione introdotti nel mercato. I tre anticoagulanti più potenti sono il brodifacoum, il flocoumafen e il difethialone.
Non è nota alcuna resistenza reale ai tre anticoagulanti più potenti di seconda generazione nei ratti norvegesi e nei topi domestici.