Tests de la résistance

Depuis que les premiers rongeurs résistants aux anticoagulants ont été découverts en Écosse en 1958, les chercheurs se sont efforcés de trouver des moyens fiables de distinguer les animaux résistants des animaux sensibles. Plusieurs méthodes d'essai différentes restent disponibles et sont largement utilisées ; chacune a ses avantages et ses inconvénients.

Essais de consommation en laboratoire sans choix

Les premières méthodes de test de résistance aux anticoagulants proposées par l'Organisation Mondiale de la Santé reposaient sur des essais de consommation en laboratoire sans choix dans lesquels des appâts, contenant la concentration normalement utilisée de l'ingrédient actif à l'étude, étaient offerts à des groupes de rongeurs en cage individuelle pendant différents nombres de jours. Des tests de référence ont été effectués pour chaque espèce de rongeurs à l'aide de souches sensibles. Les courbes dose/réponse résultantes ont été soumises à une analyse probit pour obtenir des percentiles de dose létale, exprimés en nombre de jours de consommaton continue nécessaires pour tuer différents percentiles de populations sensibles. Les individus qui ont survécu à la période de consommation létale nécessaire pour tuer 99 % des animaux sensibles (c.-à-d. le LFP99) ont été considérés comme résistants. Bien qu'ils aient été effectués en laboratoire, ces tests pouvaient être facilement interprétés en termes de résultats pratiques des traitements de lutte contre les rongeurs. Cela s'explique par le fait que la résistance a été définie en fonction de la période d'approvisionnement, sans offrir de choix, sur des appâts à usage commercial nécessaires pour tuer un pourcentage élevé d'une population de rongeurs.

Tests de coagulation sanguine

L'inconvénient des tests de durée de consommation létale est qu'ils prennent beaucoup de temps à réaliser et, parce que la mortalité est le point final requis, ils sont discutables pour des raisons d'éthique animale. Par conséquent, des tests alternatifs ont été développés pour surmonter ces difficultés en utilisant la réponse de coagulation sanguine (BCR). Au cours des tests BCR, la capacité du sang à coaguler en présence de doses mesurées d'un anticoagulant est déterminée chez les animaux sensibles. On dit que les animaux sont résistants lorsque leur sang continue de coaguler lorsqu'on leur administre une dose d'anticoagulant (la dose discriminante) qui empêcherait la coagulation dans un percentile donné, normalement 99 % des rongeurs sensibles. Des tests BCR ont été effectués sur des rats bruns sur une période de 20 ans pour un certain nombre de composés anticoagulants de la première et de la deuxième génération. Grâce à cette méthode, le premier dépistage de routine de rats bruns résistants a été lancé au Royaume-Uni, ce qui a permis de délimiter certaines zones de résistance. Cependant, à leur tour, on a constaté que ces tests BCR présentaient des inconvénients. Ceux-ci étaient principalement dus au fait que les chercheurs qui les avaient développés ont introduit la variabilité en utilisant des techniques, des réactifs de laboratoire et des doses discriminantes différents.

Afin de surmonter ces difficultés, des données de référence sur le BCR des rats bruns et des souris domestiques ont été récoltées pour plusieurs anticoagulants de première et de deuxième génération par le Rodenticide Resistance Action Committee en utilisant une nouvelle méthodologie de test BCR cohérente introduite par des chercheurs de l'Université de Reading, au Royaume-Uni. Une autre difficulté majeure de la première méthode de test BCR était de relier la résistance déterminée par ces méthodes d'essai aux résultats pratiques du traitement. La nouvelle méthodologie d'essai BCR du RRAC a surmonté cette difficulté particulière en permettant, pour la première fois, de calculer les niveaux de résistance à partir des données d'essai BCR.

Ces techniques conventionnelles de laboratoire pour tester la résistance des rongeurs ont été examinées par l'Organisation européenne et méditerranéenne pour la protection des plantes (OEPP) et la résistance aux anticoagulants comme les méthodes d'essai de résistance ont récemment fait l'objet d'un bilan complet dans d'autres documents (LIEN pour plus de renseignements, Unterpunkt pour continuer la lecture).

Tests génétiques

De nouvelles avancées dans notre compréhension de la génétique de la résistance aux anticoagulants permettent maintenant de faire des tests de résistance rapides et peu coûteux qui aident à surmonter ces inconvénients (voir Classification et historique de la lutte contre les rongeurs). Les travaux de chercheurs allemands ont identifié des mutations dans le gène codant pour la vitamine K1 époxyde réductase chez les rats norvégiens et les souris domestiques responsables de la résistance aux anticoagulants dans un certain nombre de foyers de résistance en Europe. Notre compréhension croissante des SNP de résistance a permis de développer des techniques moléculaires et biologiques pour l'identification des gènes mutés de résistance dans l'ADN extrait de petits morceaux de tissus de rongeurs, et même dans des échantillons de matières fécales. Ces tests rapides, peu coûteux et humains permettent, pour la première fois, de cartographier plus en détail les foyers de résistance, ce qui, à son tour, facilitera la gestion des infestations de rongeurs résistants aux anticoagulants.

La sévérité de la résistance permise par les différents SNP, et donc leur importance en termes de gestion pratique de la lutte contre les rongeurs nuisibles, nécessite toujours une interprétation à l'aide d'études mécanistes, comme les tests d'approvisionnement en laboratoire et les tests RCB.

Toutefois, il faut faire preuve de prudence dans l'interprétation des résultats des études de dépistage de l'ADN. Certaines mutations génétiques sont « inexprimées ». C'est-à-dire qu'elles se produisent dans des parties du génome qui peuvent parfois contenir d'importantes mutations de résistance mais, en fait, elles n'ont pas d'effets observables sur la coagulation sanguine et donc sur la résistance. D'autres mutations peuvent être trouvées sur lesquelles nous n'avons aucune information préalable et celles-ci peuvent être inexprimées ou induire un degré significatif de résistance. Dans d'autres études, on découvre des souches de rongeurs résistants qui ne possèdent aucune mutation d'ADN observable.